CpG ODN佐剂序列的筛选及其免疫刺激活性研究

摘要：

目的 设计和筛选对入PBMC细胞和小鼠脾细胞具有免疫刺激活性的CpG ODN序列,研发能用于人用疫苗的有效核酸佐剂. 方法 根据具有免疫刺激活性的CpG ODN序列结构特点,设计并合成出15条候选序列,分别合成并进行非硫代和硫代修饰.分选健康人PBMC细胞及Balb/c小鼠脾细胞,以不同CpG ODN进行体外刺激,MTT法检测CpG ODN诱导细胞增殖水平.随后将筛选出的有效CpG ODN序列与人类基因组序列进行同源性比较,以评估其安全性. 结果 在刺激人PBMC和小鼠脾细胞72h后,硫代和非硫代修饰的15条序列A值均高于阴性对照组,其中IMB-AC5序列刺激人PBMC后A值分别达到0.377和0.334,与阳性对照ISS1018序列A值(0.387和0.338)接近;刺激小鼠脾细胞72h后,A值同样高于其他序列,达到0.571和0.486,与阳性对照ISS1018序列A值(0.588和0.464)接近.综合上述结果,选择5号非硫代序列作为候选佐剂.同源性比较结果显示,该序列与人类基因组序列没有同源性,与部分蛋白编码基因的同源性只有50％ ～65％,此外其部分序列与入18号染色体上的一些重复序列有同源性,最高同源性达62％.证明筛选出的新型CpG ODN佐剂IMB-AC5安全性较高.结论 设计筛选出对人PBMC细胞和小鼠脾细胞具有免疫刺激活性的CpG ODN序列IMB-AC5,与人类基因组序列具有较低同源性,为进一步研发人用疫苗佐剂奠定基础.

关键词：CpG、ODN、佐剂、免疫刺激活性、同源性

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分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目面上项目81171946;教育部高校博士学科点专项科研基金资助项目20111106120055;教育部留学回国人员启动基金资助项目20111568;云南省科技厅社会发展科技计划项目2011CA016;云南省自然科学基金资助项目2012FB188

在线出版日期：2016-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：37-42