检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型荧光定量PCR方法的建立

摘要：

目的 建立一种高敏感度的检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)DNA的实时荧光定量PCR方法,为针对HSV-2潜伏感染的治疗性疫苗和抗病毒药物疗效提供一个评价方法.方法 依据HSV-2糖蛋白D(gD)基因序列,使用序列比对软件,选取其保守区序列设计引物及TaqMan探针并进行筛选;以gD基因重组质粒pcDNA3-HSV-2 gD作为标准模板,对该检测方法的反应条件进行优化,提高其检测特异性、敏感度和重现性.结果 该检测方法特异性好,检测的最低拷贝数可达到2个拷贝,线性范围为2×100～2×108拷贝/反应,是普通PCR敏感度的103倍.该检测方法组间和组内变异系数均低于5％,说明该检测方法具有良好稳定性.结论 本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法用于检测痕量HSV-2 DNA具有特异、敏感、定量和重现性好的优点.

关键词：单纯疱疹病毒Ⅱ型、荧光定量PCR、TaqMan探针

所属期刊栏目：45

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：浙江省自然科学基金资助项目LY12H19009;浙江省科技厅基金资助项目2011C23002,2011F20015;浙江省公益技术研究社会发展项目2014C33276

在线出版日期：2016-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：51-54