慢病毒载体法建立乳腺癌GFP-ST3稳定细胞株

摘要：

目的 慢病毒载体法建立乳腺癌GFP-ST3稳定细胞株.方法 采用PCR扩增α2,3-ST全长基因片段,克隆至慢病毒载体进行测序分析,将重组慢病毒载体转染人乳腺癌细胞,嘌呤霉素抗性筛选,经荧光显微镜观察、实时定量PCR、West-ern blot检测α2,3-ST的表达.结果 成功构建了慢病毒载体pGLV5-H1-GFP-ST3,体外转染乳腺癌细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达,α2,3-STmRNA表达和蛋白水平均明显升高(P＜0.05),获得稳转细胞株.结论 成功构建了绿色荧光蛋白为报告基因的α2,3-ST慢病毒载体,并在MDA-MB-231中稳定表达,为进一步研究乳腺癌细胞膜连α2,3-唾液酸水平增高与其侵袭和转移潜能的调控提供实验模型.

关键词：α2、3-ST、绿色荧光蛋白、转染、表达

所属期刊栏目：44

分类号：R3(基础医学)

资助基金：黑龙江省普通高等学校青年学术骨干计划基金资助项目1253G067

在线出版日期：2015-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：57-59,62