10.11969/j.issn.1673-548X.2015.05.030
AMPK激动剂AICAR通过阻滞细胞周期于G0 /G1 期抑制肺动脉平滑肌细胞增殖
目的 建立PDGF-BB诱导的原代大鼠肺动脉平滑肌细胞( pulmonary vascular smooth muscle cells,PASMCs)的增殖细胞模型,通过AMPK激动剂AICAR干预,探讨AICAR对PASMCs细胞周期和增殖的影响及其机制,为肺血管重构防治寻找靶点. 方法 通过20ng/ml PDGF-BB刺激诱导PASMCs增殖建立细胞模型,采用 AICAR(0. 5mmol/L)干预 PDGF-BB诱导的PASMCs增殖,Western blot法检测总的和磷酸化的AMPK, CCK-8检测PASMCs增殖,流式细胞仪分析细胞周期,实时定量PCR ( RT-PCR)检测cyclinD1、cyclinE、CDK2/4/6 mRNA的表达. 结果 Western blot法检测表明AICAR可以活化AMPK,CCK-8检测结果表明AICAR能够抑制PDGF-BB诱导的PASMCs增殖;流式细胞仪检测结果表明AICAR能够抑制细胞周期于G0/G1 期, RT-PCR结果表明AICAR可以抑制cyclinD1、cyclinE、CDK2、CDK4和CDK6的mRNA的表达. 结论 AICAR通过抑制cyclinD1、cyclinE、CDK2/4/6 的mRNA表达阻滞细胞周期于G0/G1 ~S期,抑制PASMCs增殖.
AMPK、PDGF-BB、肺动脉平滑肌细胞、细胞周期、增殖
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R3(基础医学)
2015-08-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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