Optiprep梯度离心法提取大鼠肝星状细胞的研究

摘要：

目的 探索SD大鼠肝星状细胞(HSCs)的提取方法,观察其生物学特性,为进一步研究它在肝纤维化和免疫应答中的可能机制奠定基础.方法 依次采用前灌注液、0.15 mg/ml的链霉蛋白酶E和0.5mg/ml的Ⅳ型胶原酶在体原位灌注消化肝脏.肝脏离体剪碎后,在0.3mg/ml链霉蛋白酶E、0.3 mg/mlⅣ型胶原酶、0.02mg/ml DNA酶Ⅰ液中37℃振荡消化20min,低速离心(30g,5min)去除残余肝实质细胞,Optiprep密度梯度离心法获得纯化的HSCs.台盼蓝排斥试验评估HSCs细胞存活率；328nm紫外光激发HSCs自发蓝绿色荧光结合光镜鉴定细胞纯度；α-SMA免疫细胞化学方法鉴定HSCs;通过光镜观察HSCs的形态学变化.结果 本方法,每只大鼠肝脏HSCs产量约8.2×106个,HSCs存活率在90％以上；原代培养24h后,纯度在85％以上；传1代后,纯度达95％以上.结论 本方法简单、经济、实用,可获得较多的大鼠HSCs.

关键词：肝星状细胞、大鼠、提取、培养

所属期刊栏目：42

分类号：R71;R32

在线出版日期：2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：142-144