10.3969/j.issn.1673-548X.2012.09.024
Mfn2基因沉默对HepG2细胞葡萄糖代谢和胰岛素信号通路的影响
目的 研究线粒体融合素基因-2(mitofusin -2,Mfn2)沉默对人肝癌细胞株(HepG2)葡萄糖代谢和胰岛素信号通路分子丝/苏氨酸蛋白激酶( Akt1)的影响.方法 构建Mfn2短发夹双链RNA(Mfn2shRNA)和阴性对照短发夹双链RNA(HK),将HepG2细胞株分为空白对照组(NC)、阴性对照组(HK)、Mfn2shRNA质粒转染组(Mfn2).HK和Mfn2组细胞应用lipofectamine2000转染HepG2细胞株;采用葡萄糖氧化酶的方法和氚标记葡萄糖(3-3H- Glucose)放射性核素示踪法检测细胞葡萄糖消耗量和摄取率;Western blotting检测Mfn2和Akt1蛋白表达.结果 与HK组比较,Mfn2组细胞Mfn2蛋白表达明显下降(0.23 ±0.05 vs 0.51 ±0.14,P=0.034),Akt1表达差异无统计学意义(0.13 ±0.00 vs 0.14 ±0.01,P=0.055);Mfn2组细胞葡萄糖消耗量明显下降(8.72±0.62 vs 9.75 ±0.35,P=0.001),葡萄糖摄取率亦显著下降(7.94±0.04 vs 9.64±0.13,P=0.002).结论 抑制Mfn2基因表达导致HepG2细胞葡萄糖代谢下降;Mfn2表达对葡萄糖代谢的影响是否通过PI3K/Akt信号通路介导还需要进一步研究.
线粒体融合素基因-2、HepG2细胞、葡萄糖代谢、丝/苏氨酸蛋白激酶
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R73;R24
湖北省自然科学基金资助项目2008CDB128
2013-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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