人源化乙肝表面抗体重链克隆、表达及免疫学特性初步鉴定

摘要：

目的 建立一种利用单细胞分选技术克隆人源化乙肝表面抗体重链的方法.方法 从乙肝疫苗接种志愿者外周血中分选得到单个抗体分泌细胞,单细胞RT - PCR筛选20个单菌落,挑选其中有IgG保守区域的克隆全长,并将IgG(H)基因全长克隆到pEGFP -N1载体,转染COS -7细胞,取上清液进行Western blotting验证,并采用Batty饱和法测定亲和力常数.结果 筛选得到IgG(H)能与HBsAg结合,且Ka值达到2.39×109L/mol.结论 利用单细胞分选克隆技术获得的抗体重链亲和力较高.

关键词：单细胞分选、单细胞反转录聚合酶链反应、乙肝表面抗体、亲和力

所属期刊栏目：41

分类号：R73;R37

资助基金：浙江省科技厅分析测试资助项目2009F70067

在线出版日期：2012-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：54-57