慢病毒介导的RNAi对人多发性骨髓瘤DKK1基因表达的抑制作用

摘要：

目的 观察慢病毒表达载体介导的RNA干扰(RNAi)对人骨髓瘤细胞株U266 中dickkopf1(DKK1)的抑制作用,为以DKK1基因为靶点的骨髓瘤骨病(myeloma bone disease,MBD)的基因治疗研究奠定基础.方法 把构建好的DKK1 shRNA慢病毒表达载体,与慢病毒包装质粒混合,以L ipofectam ine 2000转染293FT细胞,48h后收取含病毒的上清液、浓缩,并检测病毒效价;RT-PCR和Western blot检测病毒感染多发性骨髓瘤细胞U266细胞后的DKK1表达.结果 浓缩后的慢病毒效价为4 27×105 TU/ml;DKK1shRNA慢病毒感染的U266细胞分别与未感染的U266细胞、无关序列shRNA慢病毒感染U266细胞DKK1表达量比较,统计学均有显著性差异(P<0.001).结论 慢病毒介导的干扰RNA能有效抑制骨髓瘤细胞U266中DKK1的表达.

关键词：DKK1、RNAi、慢病毒载体

所属期刊栏目：39

分类号：R73;R39

资助基金：温州医学院5010重大项目子课题XNK05005

在线出版日期：2010-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：85-87