10.3969/j.issn.1673-548X.2004.12.020
葡萄糖对SVAREC细胞P-糖蛋白转运和表达的影响
目的探讨葡萄糖对内皮细胞SVAREC膜转运蛋白P-糖蛋白的底物转运和表达的影响.方法1.用含10%胎牛血清的DME培养液将SVAREC细胞传入24孔板,等细胞贴壁后将细胞分成4组,分别换以下条件刺激,A组:低葡萄糖(5.5mmol/L);B组:高葡萄糖(25mmol/L);C组:低葡萄糖(5.5mmol/L)+Verapamil(10-4Mol);D组:高葡萄糖(25mmol/L)+Verapamil(10-4 Mol);每组都同时用不同浓度的秋水仙碱(0;12.5;25;50ug/ml)刺激72小时,以MTT法测定细胞的耐受性.2.按上述方法将细胞传入培养皿中,待细胞贴壁后,分别换葡萄糖浓度为5.5mmol/L,25mmol/L和50mmol/L的DMEM培养液继续培养72小时,提取细胞膜蛋白,Western-blot检测P-糖蛋白的蛋白表达.结果高糖处理的细胞对秋水仙碱(P-糖蛋白的转运底物)细胞毒的耐受性明显低于低糖处理的细胞,在秋水仙碱浓度为25ug/ml时,差异最为显著(P<0.01),Verapamil(P-糖蛋白转运的特异抑制剂)共处理的低糖组细胞对秋水仙碱的耐受性显著降低(秋水仙碱浓度为25ug/L时,P<0.01),而Verapamil处理后的高糖和低糖组细胞对秋水仙碱的耐受性无显著性差异.Western-blot结果显示5.5mmol/L葡萄糖刺激的细胞P-糖蛋白蛋白表达明显高于25mmol/L和50mmol/L葡萄糖刺激的细胞,而25mmol/L和50mmol/L之间没有显著差异.结论高糖能够降低内皮细胞P-糖蛋白对其底物的转运和表达,增加其底物秋水仙碱在细胞中的积累,使细胞的耐受性下降.
内皮细胞、秋水仙碱、P-糖蛋白、转运
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R3(基础医学)
2006-11-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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