SIRT1调节P I3 K/AKT/mTOR自噬途径对神经元凋亡的改善作用

摘要：

目的 脊髓损伤(SCI)后有效防止神经元的进一步凋亡,是改善神经损伤修复的关键,而去乙酰化酶SIRT1在神经系统疾病中发挥着重要保护作用.文中旨在探索SIRT1在脊髓损伤修复中的表达与相关性,并探讨其对神经元损伤修复的调节机制.方法 将40只大鼠随机分为Sham组(仅打开椎板,然后缝合)、SCI 1 w组、SCI 2 w组、SCI 4 w组(分别在1w、2w、4w处死大鼠,取出脊髓组织),每组10只.利用qPCR、Western blot检测各组脊髓组织中SIRT1表达量,ELISA检测8?OHdG的表达;通过小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞和H2 O2制作体外神经元氧化损伤模型,并给予SIRT1激动剂(SRT1720),利用CCK8实验确定H2 O2和SRT1720浓度后将细胞分为对照组、2μmol/L SRT1720组、100μmol/L H2 O2组、2μmol/L SRT1720+100μmol/L H2 O2组.利用TUNEL实验检测细胞凋亡水平,Western blot和免疫荧光染色检测SIRT1、自噬相关通路蛋白的表达.结果 SCI 1 w组、SCI 2 w组、SCI 4 w组脊髓中SIRT1的表达较Sham组显著降低,且随病程延长而逐渐降低(P<0.01).SCI 1 w组、SCI 2 w组、SCI 4 w组脊髓中的8?OHdG含量显著高于Sham组,随损伤时间延长而增加,与SIRT1蛋白表达呈负相关(r=-0.67,P<0.05).体外细胞培养的TUNEL结果显示,2μmol/L SRT1720+100μmol/L H2 O2组及对照组细胞凋亡水平明显低于100μmol/L H2 O2组(P<0.01).Western blot检测结果显示,2μmol/L SRT1720组和2μmol/L SRT1720+100μmol/L H2 O2组PI3K、AKT、mTOR、Caspase?3蛋白表达明显低于对照组和100μmol/L H2O2组(P<0.05),而2μmol/L SRT1720组和2μmol/L SRT1720+100μmol/L H2O2组SIRT1、LC3B表达水平显著高于对照组和100μmol/L H2O2组(P<0.01).结论 SIRT1的表达与脊髓损伤病理过程密切相关,且SIRT1通过调节PI3K/AKT/mTOR自噬信号途径,降低神经元凋亡来促进神经元损伤修复.

关键词：SIRT1、脊髓损伤、神经损伤修复、自噬、凋亡

所属期刊栏目：35

分类号：R745.4(神经病学与精神病学)

资助基金：辽宁省教育厅科学研究面上项目;大连市科技创新基金

在线出版日期：2022-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1144-1149