miR-200b靶向调控性别决定相关基因簇2对绒毛外滋养层细胞侵袭和迁移能力的影响

摘要：

目的 关于miR-200b和性别决定相关基因簇2(SOX2)对绒毛外滋养层细胞生物学行为影响的研究较少.文中旨在探讨miR-200b靶向调控SOX2对绒毛外滋养层细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 选取2017年12月至2019年1月海南现代妇女儿童医院妇产科留取的40份胎盘组织标本.其中子痫前期患者18例,正常妊娠者22例.免疫组织化学法检测子痫前期胎盘和正常胎盘组织标本中SOX2的表达;生物信息学预测调控SOX2的基因及SOX2与基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的作用关系;高通量测序筛选不同胎盘组织中差异表达的miRNA;RT-qPCR检测分析miR-200b表达水平;荧光素酶基因报告分析miR-200b与SOX2的作用关系;以HTR8-SVneo作为研究细胞模型,分为:空载组(转染慢病毒质粒空载)、miRNA-200b组(转染pHRi-miRNA-200b)、sh-SOX2组(转染pHRi-sh-SOX2)、miRNA-200b+SOX2组(共转染pHRi-miR-NA-200b、pHRi-SOX2质粒).Transwell实验、划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western blot检测SOX2、MMP2与MMP9蛋白的表达水平.结果 正常胎盘组织中SOX2免疫组化评分明显低于子痫前期胎盘组织[(3.2±0.41)分vs(8.4±1.2)分,P<0.05].RT-qPCR检测结果显示,与正常胎盘组织miRNA-200b表达量(1.02±0.08)比较,子痫前期胎盘组织(0.25±0.05)明显降低(P<0.05).双荧光素酶报告基因结果显示,miRNA-200b明显抑制野生型SOX2的荧光素酶活性(P<0.05).与空载组侵袭细胞数量、细胞迁移率相比,miRNA-200b组和sh-SOX2组明显下降(P<0.05),miRNA-200b+SOX2组较miRNA-200b组明显增多(P<0.05).miRNA-200b组、sh-SOX2组中SOX2、MMP2和MMP9蛋白表达较空载组明显下降(P<0.05),miRNA-200b+SOX2组较miRNA-200b组明显升高(P<0.05).结论 SOX2在子痫前期患者的胎盘组织中表达量异常升高,SOX2蛋白可能受miR-200b的调节而靶向调控MMP2和MMP9的表达,影响滋养细胞的侵袭、迁移能力.

关键词：性别决定相关基因簇2、子痫前期、滋养层细胞、侵袭、迁移

所属期刊栏目：33

分类号：R33(人体生理学)

在线出版日期：2020-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1076-1083