过表达GATA-4基因的骨髓间充质干细胞外泌体对心肌梗死后心功能的影响

摘要：

目的 过表达GATA-4基因的骨髓间充质干细胞(BMSC)外泌体(BMSCGATA-4-外泌体)可以促进BMSC向心肌样细胞分化,但其分子机制不详.文章探讨过表达BMSCGATA-4-外泌体通过miRNA-673-5p/Tsc-1分子轴促进干细胞向心肌样细胞分化的机制.方法 将BMSC-外泌体、BMSC空载体-外泌体、BMSCGATA-4-外泌体、BMSCmiR-673-5p-mimic-外泌体、BMSCmiR-673-5p-inhibitor-外泌体小鼠建模后48 h经尾静脉注入,分别作为BMSC组、空载体组、GATA-4组、模拟组、抑制组,每组3只;另设置梗死未处理组(建模,未给予任何exosome处理)及正常组(不建模)作为对照,各3只.采用心脏彩超检测各组心功能.采用RT-PCR检测梗死后心肌细胞内miRNA-673-5p表达.同时提取相同梗死部位心肌组织,采用RT-PCR检测心肌α-actin、CX43、Desmin、cTnT表达.采用Western blot检测miRNA-673-5p对应靶基因Tsc-1、Erk1/2及Mef2c蛋白表达.结果 GATA-4组、模拟组心功能较BMSC组和空载体组改善(P<0.05);与GATA-4组比,模拟组改善、抑制组恶化(P<0.05).GATA-4组、模拟组miRNA-673-5p表达较BMSC组和空载体组增多(P<0.05);与GATA-4组miRNA-673-5p表达比较,模拟组增多,抑制组减少(P<0.05);与BMSC组比较,GATA-4组、模拟组增多(P<0.05);与正常组比较,梗死未处理组心肌细胞内Tsc-1的表达增多,GATA-4组和模拟组Tsc-1、Erk1/2、Mef2c表达均减少(P<0.05);BMSC组、空载体组、GATA-4组、模拟组、抑制组心肌细胞内Tsc-1表达(0.82±0.03、0.80±0.06、0.60±0.07、0.47±0.05、0.86±0.06)较梗死未处理组(1.10±0.06)减少(P<0.05);BMSC组、空载体组、GATA-4组、模拟组、抑制组心肌细胞内Erk1/2表达(1.02±0.07、0.99±0.07、0.77±0.14、0.63±0.21、1.06±0.08)较梗死未处理组(1.31±0.15)减少(P<0.05);BMSC组、空载体组、GATA-4组、模拟组、抑制组心肌细胞内Mef2c表达(0.87±0.08、0.86±0.05、0.72±0.10、0.62±0.09、0.91±0.16)较梗死未处理组(1.12±0.09)减少(P<0.05);与BMSC组比,GATA-4组Tsc-1和Erk1/2以及模拟组中Tsc-1、Erk1/2、Mef2c表达均减少(P<0.05);GATA-4组Tsc-1和模拟组中Tsc-1、Erk1/2、Mef2c表达均较空载体组减少(P<0.05);与GATA-4组比,模拟组中Tsc-1的表达减少,抑制组心肌细胞内Tsc-1、Erk1/2、Mef2c表达增多(P<0.05).抑制组心肌细胞内Tsc-1的表达较模拟组增多(P<0.05).结论 过表达BMSCGATA-4-外泌体通过miRNA-673-5p抑制Tsc-1蛋白表达,从而改善心肌梗死后心功能.

关键词：miRNA-673-5p、Tsc-1蛋白、GATA-4、外泌体、小鼠骨髓间充质干细胞

所属期刊栏目：33

分类号：R284(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;云南省卫生和计划生育委员会医学后备人才项目

在线出版日期：2020-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：678-683