10.16571/j.cnki.1008-8199.2018.07.008
大黄酸对胰岛素信号通路及其负性调控蛋白蛋白酪氨酸磷酸酶1B的影响
目的 大黄酸改善糖代谢的作用机制尚不明确,文章旨在探讨大黄酸对C2C12细胞胰岛素信号通路的影响.方法 测定大黄酸抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的最适底物、最佳酶浓度,计算大黄酸对PTP1B的半抑制浓度(IC50).将C2C12细胞诱导分化成熟,分为大黄酸组[分别给予不同浓度大黄酸(0.1、1、10、100μmol/L)处理];阳性对照组(给予10 nmol/L胰岛素刺激0.5 h),空白对照组(加入等体积溶剂处理).Western blot方法检测各组细胞胰岛素信号通路相关蛋白的变化,免疫共沉淀法检测PTP1B的活性变化.结果 大黄酸对PTP1B的半抑制浓度(IC50)为80.5μmol/L.C2C12肌细胞经不同浓度大黄酸处理后,随大黄酸浓度的增加,细胞内总蛋白酪氨酸磷酸化水平略增加;经胰岛素处理后,细胞内总蛋白酪氨酸磷酸化水平有一定增加.C2C12细胞经胰岛素处理后,IRβ、IRS1的相对磷酸化水平以及Glut4的蛋白表达水平升高;空白对照组IRβ、IRS1、Glut4蛋白相对表达量分别为0.37、0.39、0.15,经不同浓度大黄酸处理,IRβ的相对磷酸化水平在0.1~10μmol/L处理时无明显变化(0.37、0.31、0.32),100μmol/L处理时升高至0.67;IRS1的相对磷酸化水平在0.1~100μmol/L浓度时升高至0.49、0.50、0.41、0.59;Glut4的蛋白相对表达水平在0.1~100μmol/L处理时升高至0.37、0.48、0.90、0.88.在C2C12细胞中,与0μmol/L大黄酸处理组比较,10 nmol胰岛素处理组及0.1~10μmol/L大黄酸处理组细胞中PTP1B活性无明显变化,100μmol/L大黄酸处理组细胞中PTP1B活性降低.结论 大黄酸能降低PTP1B活性并增强胰岛素信号传递,推测胰岛素信号传递增强可能与骨骼肌细胞PTP1B活性降低有关.
大黄酸、蛋白酪氨酸磷酸酶1B、胰岛素信号通路
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R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
国家自然科学基金81471018;江苏省博士后基金1501120C
2018-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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