杨梅素阻断转化生长因子-β诱导的心脏成纤维细胞活化增殖和分泌

摘要：

目的 有关杨梅素能否抑制心脏成纤维细胞的激活和功能进而抑制心肌纤维化的报道不多.文章探讨杨梅素对心脏成纤维细胞活化增殖和分泌功能的影响,以及可能的分子机制. 方法 分离培养SD大鼠乳鼠成纤维细胞,采用转化生长因子(TGF-β)刺激诱导成纤维细胞的活化增殖和分泌.采用不同浓度的杨梅素(1,3,10,30,100 μmol/L)孵育成纤维细胞24 h,观察其对心脏成纤维细胞活化,增殖和分泌的影响;采用CKK8试剂盒检测细胞增殖活性;采用RT-PCR检测促纤维化因子的转录水平;采用免疫荧光染色检测α-SMA蛋白的表达;采用免疫印迹检测可能的信号蛋白的改变. 结果 免疫荧光结果显示:与对照组比较,TGF-β组、30 μmol/L杨梅素+TGF-β组、100 μmol/L杨梅素+TGF-β组成纤维细胞α-SMA表达的荧光亮度明显增强(P<0.05);与TGF-β组比较,30 μmol/L杨梅素+TGF-β组、100 μmol/L杨梅素+TGF-β组α-SMA表达的荧光亮度减弱(P<0.05). RT-PCR结果显示:TGF-β组、30 μmol/L杨梅素+TGF-β组、100 μmol/L杨梅素+TGF-β组刺激成纤维细胞48h,成纤维细胞I型胶原、III型胶原、纤维连接蛋白和结缔组织生长因子表达的转录水平明显高于对照组(P<0.05);而30μmol/L杨梅素+TGF-β和100μmol/L杨梅素+TGF-β组细胞中上述促纤维化因子的转录水平均低于TGF-β组(P<0.05).免疫印迹结果显示:与对照组比较,TGF-β组、30 μmol/L杨梅素+TGF-β组、100 μmol/L杨梅素+TGF-β组成纤维细胞smad2、smad3的磷酸化水平升高(P<0.05),TGF-β组smad4表达增加(P<0.05);与TGF-β组smad2、smad3磷酸化水平和smad4表达(3.24±0.01、3.65±0.01、0.69±0.01)比较,30μmol/L杨梅素+TGF-β组(2.11±0.02、2.98±0.03、0.45±0.03)和100μmol/L杨梅素+TGF-β组(1.98±0.02、1.56±0.028、0.41±0.02)均明显降低(P<0.05). 结论 杨梅素可以通过抑制smad信号通路阻断TGF-β诱导的成纤维细胞活化增殖和分泌.

关键词：杨梅素、成纤维细胞、心肌纤维化、smad信号通路、转化生长因子-β

所属期刊栏目：31

分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：荆门市一般科技项目YFYB2017006

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：590-594