达玛-24-烯-3β-乙酰氧基-20s-醇对胃癌细胞增殖的抑制作用

摘要：

目的 前期研究发现中药连翘醇提物具有明显体外抑制肿瘤细胞的作用,文章进一步探讨从中药连翘提取的化合物达玛-24-烯-3β-乙酰氧基-20s-醇(Dammar-24-ene-3β-acetate-20S-ol,DM)体外抗肿瘤作用及其机制. 方法 采用MTT法检测DM对胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823和MKN-45体外抑制作用.实验分为MKN-45对照组及其低、高剂量组,BGC-823对照组及其低、高剂量组,SGC-7901对照组及其低、高剂量组,对照组均为新鲜培养基,低剂量DM为10、50μg/mL,流式细胞仪检测凋亡细胞比例.应用CellQuest软件分析结果,记录细胞不同周期的比例.采用DCFH-DA探针检测ROS水平,实验分为空白对照组,多西紫杉醇组和DM组.配置微管聚集实验反应体系,其中多西紫杉醇10μmol/L,DM 终浓度选择50或100μmol/L,空白对照组不加药物,采用微管聚集实验和微管蛋白免疫荧光染色研究DM对于微管系统的影响. 结果 50μg/mL对于3株胃癌细胞抑制率均在80%以上,IC50 分别为:MKN-45 (11.72±1.35)μg/mL;BGC-823 (17.19±0.82)μg/mL;SGC-7901 (7.55±0.79)μg/mL.2μg/mL DM处理48h后再以低密度培养8d,细胞克隆较对照组明显减少.与MKN-45对照组凋亡细胞[(21.1±2.5)%]相比,MKN-45低剂量组和高剂量组凋亡细胞比率[(25.1±1.3)%和(55.2±2.3)%]均有明显升高(P<0.01).BGC-823对照组凋亡细胞百分率(13.2±2.4)%比较,BGC-823低、高剂量组凋亡细胞百分率[(18.2±2.1)%、(41.8±2.8)%]明显升高(P<0.01).与SGC-7901对照组凋亡细胞率[(10.5±1.8)%]比较,SGC-7901高剂量DM组凋亡细胞率[(21.1±1.9)%]升高(P<0.05),而与SGC-7901低剂量DM组[(12.3±1.6)%]差异无统计学意义(P>0.05).与MKN-45对照组比较,MKN-45低剂量组S期细胞百分率降低[(14.5±2.7)% vs (12.3±3.3)%,P>0.05].与BGC-823对照组比较,BGC-823低剂量组细胞S期百分率增加[(12.2±5.4)% vs (20.2±2.1)%,P<0.05].与SGC-7901对照组比较,SGC-7901低剂量组S期细胞百分率增加[(21.5±3.8)% vs (31.3±2.6%),P<0.05].检测DM处理后细胞内活性氧水平研究发现,10、50μg/mL DM处理48h 3株细胞均可见剂量依赖性ROS水平上升.微管蛋白免疫荧光染色可见采用IC50浓度的多西紫杉醇和10μg/mL DM处理48h后,MKN-45荧光信号均表现为局部浓聚、紊乱. 结论 达玛-24-烯-3β-乙酰氧基-20s-醇能够将胃癌细胞周期阻滞于S期,诱导细胞凋亡,从而抑制细胞增殖作用.

关键词：达玛-24-烯-3β-乙酰氧基-20s-醇、胃癌细胞、增殖抑制

所属期刊栏目：30

分类号：R735.2(肿瘤学)

在线出版日期：2017-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：481-485