1，25-（OH）2 D3对肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca2＋浓度和PI3K／AKT／mTOR通路的影响

摘要：

目的：特发性肺纤维化（ idiopathic pulmonary fibrosis ，IPF）是一种慢性炎症性疾病，病因不明，缺乏有效的治疗方法。文中旨在探讨肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca2＋和PI3K／AKT／mTOR通路在大鼠IPF中的作用，以及1，25?（ OH）2 D3对Ca2＋浓度和PI3K／AKT／mTOR通路的影响。方法150只雄性SD大鼠随机分为：预防组（对照组Ⅰ、模型组Ⅰ、给药组Ⅰ，每组20只）和治疗组（对照组Ⅱ、模型组Ⅱ、给药组Ⅱ，每组30只）。对照组Ⅰ／Ⅱ行气管暴露手术，气管内给以200μL／只的无菌等渗盐水，并分别于第2和14天开始腹腔注射等渗盐水（200μL／只）；模型组Ⅰ／Ⅱ气管内灌注博来霉素（5 mg／kg），并分别于手术后第2和14天开始腹腔注射维生素D3的溶剂（0．1％乙醇和99．9％的丙二醇，1μL／g体重）；给药组Ⅰ／Ⅱ气管内灌注博来霉素（5 mg／kg），并分别于手术后第2和14天开始腹腔注射1，25?（OH）2D3（2μg ／kg体重）。大鼠气管内注射博来霉素建立IPF模型，给药组腹腔注射1，25?（ OH）2 D3进行预防和治疗。检测各组大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量，分离肺泡Ⅱ型上皮细胞并用Fluo?3AM荧光负载，激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2＋浓度。 RT ?PCR方法检测PI3K、AKT、mTOR mRNA的表达水平。结果模型组Ⅰ／Ⅱ和给药组Ⅰ／Ⅱ中大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量、肺泡Ⅱ型上皮细胞内Ca2＋浓度以及PI3K、AKT、mTOR mRNA表达，在各时间点与相应对照组Ⅰ／Ⅱ相比均明显升高（ P＜0．05或P＜0．01）；给药组Ⅰ／Ⅱ与模型组Ⅰ／Ⅱ相比，上述指标均有显著降低（ P＜0．05或P＜0．01）。模型组Ⅰ／Ⅱ和给药组Ⅰ／Ⅱ中Ca2＋浓度与PI3K、AKT、mTOR mRNA表达之间具有显著正相关（ r＝0．5988、r＝0．6230、r＝0．6603，P＜0．01；r＝0．7012、r＝0．6323、r＝0．7403，P＜0．01）。结论 PI3K?AKT?mTOR通路在大鼠IPF的发生发展中起重要作用，1，25?（ OH）2 D3可以降低肺泡Ⅱ型上皮细胞内Ca2＋的浓度，抑制PI3K?AKT?mTOR通路，进而抑制IPF的发生发展。

关键词：1、25-(OH) 2 D3、SD大鼠、肺纤维化、肺泡Ⅱ型上皮细胞、Ca2+浓度、PI3K/AKT/mTOR信号通路

所属期刊栏目：29

分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：山东省自然科学基金 ZR2011HM062；山东省医药卫生科技发展计划项目2015WS0490；滨州医学院科技计划项目BY2015KJ39

在线出版日期：2016-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1040-1045