PKC 在枸橼酸舒芬太尼预处理大鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤模型中的作用

摘要：

目的：蛋白激酶C（protein kinase C， PKC）信号通路是预处理早期保护机制细胞信号传递的共同通路，PKC是预处理早期保护的必备信号传递物质。文中探讨PKC在枸橼酸舒芬太尼预处理大鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤模型中的作用。方法原代心肌细胞分离培养。将5d的心肌细胞分成对照组、缺氧／复氧组、舒芬太尼组和佛波醇＋枸橼酸舒芬太尼组。对照组细胞培养不予任何处理，建立培养乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤模型，舒芬太尼组加入舒芬太尼至终浓度0．0003μmol／L，佛波醇＋舒芬太尼组使用佛波醇干预10 min后再给予枸橼酸舒芬太尼，并在各组相应处理后取材检测细胞增殖情况。免疫荧光共聚焦技术观察Connexin43（Cx43）蛋白的平均光密度，流式细胞术检测各期的凋亡率，Western blot检测细胞缝隙连接蛋白Cx43总蛋白。结果与对照组相比，缺氧／复氧组、舒芬太尼处理组、佛波醇＋舒芬太尼组细胞增殖明显增多（ P＜0．05）；与缺氧／复氧组增殖（0．3258±0．0235）相比，舒芬太尼组（0．4980±0．04324）、佛波醇＋舒芬太尼组（0．7240±0．1234）的细胞增殖增多（P＜0．05）。与舒芬太尼组增殖（0．4980±0．04324）相比，佛波醇＋舒芬太尼组（0．7240±0．1234）的细胞增殖增多（P＜0．05）。流式细胞术检测显示，与对照组相比，缺氧／复氧组、舒芬太尼组、佛波醇＋舒芬太尼组早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率升高（P＜0．05）；与缺氧／复氧组早、晚、总凋亡率[（4．96±0．59）％、（18．77±0．92）％、（23．73±0．51）％]相比，舒芬太尼组[（5．86±0．38）％、（10．37±0．38）％、（16．23±0．32）％]、佛波醇＋舒芬太尼处理组[（5．71±0．58）％、（5．54±0．43）％、（11．24±0．62）％]均显著降低（P＜0．05），其中舒芬太尼处理组较佛波醇＋舒芬太尼处理组晚期总凋亡率均低，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论枸橼酸舒芬太尼对缺氧复氧损伤的心肌具有保护作用， PKC激动剂联合枸橼酸舒芬太尼对心肌细胞缺氧／复氧损伤有叠加的保护效应。

关键词：蛋白激酶C、枸橼酸舒芬太尼、缺氧/复氧损伤、Cx43

所属期刊栏目：29

分类号：R96(药理学)

资助基金：国家自然科学基金81260029

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：688-692