三叶青总黄酮通过Wnt/β-catenin通路抑制结肠癌细胞周期及增殖

摘要：

目的 三叶青总黄酮(Total Flavonoids of Tetrastigma Hemsleyanum,TFTH)对多种肿瘤具有较强的抑制作用.分析TFTH对结肠癌细胞周期及细胞增殖能力的影响,并进一步探索其分子机制. 方法 采取CCK-8试验及克隆形成试验检测不同浓度TFTH(0、1.6、3.2及6.4 mg/mL)对人结肠癌细胞HT29及SW620细胞增殖能力的影响,并运用流式细胞术检测不同浓度TFTH对肿瘤细胞周期的调节作用;通过免疫印迹及实时荧光定量聚合酶链反应等方法证实TFTH对Wnt/β-cate-nin通路有效调控及细胞周期相关蛋白Cylin D1和c-myc的表达. 结果 在0、1.6、3.2和6.4 mg/mL TFTH孵育后,SW620细胞在6孔板中形成的克隆数量分别为(196±25.06)、(75.33±7.64)、(19 ±6.08)、0个/孔,HT29细胞为(206.67±30.55)、(106 ±12.17)、(9.67 ±4.04)、0个/孔,各浓度间两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结肠癌细胞S±G2/M期细胞的比例降低(P＜0.05),且呈浓度依赖性.同时,TFTH干预的HT29细胞及SW620细胞内活化的β3-catenin蛋白的表达随药物浓度增高而逐渐降低,将0、1.6、3.2和6.4 mg/mL TFTH作用于SW620细胞后,a-β-catenin蛋白的IOD分别为231.46±20.66、109.42±15.58、63.14±2.33、6.38±11.05;作用于HT29细胞时,其IOD分别为817.28±76.55、566.10±96.80、324.23±53.51、141.67±34.35,与0 mg/mL相比,差异均有统计学意义(P＜0.01),进一步研究发现,与0 mg/mL相比,1.6、3.2、6.4 mg/mL的TFTH干预后细胞内Cyclin D1和c-myc在mRNA及蛋白质水平的表达也显著下调(P＜0.05). 结论 TFTH抑制结肠癌细胞增殖能力,其作用机制与下调肿瘤细胞Wnt/β-catenin信号通路活性,抑制细胞周期有关.

关键词：三叶青总黄酮、结肠癌、细胞周期、细胞增殖

所属期刊栏目：29

分类号：R285(中药学)

资助基金：国家自然科学基金81270453

在线出版日期：2016-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：582-586