10.3969/j.issn.1008-8199.2014.12.006
Tre 酶真核表达载体构建及其特异性识别 loxLTR序列的功能鉴定
目的:清除人类免疫缺陷病毒( human immunodeficiency virus , HIV)前病毒是治愈艾滋病的关键。构建Tre酶真核表达载体,鉴定其特异性识别HIV前病毒中所含有的loxLTR序列功能。方法经基因合成、PCR、酶切、连接等基因重组技术将Tre基因插入pcDNA3.1真核表达载体中,将EGFPpA-LoxLTR序列插入pmCherry-N1载体中,并经酶切、PCR、测序鉴定;用电穿孔法将构建的载体转染到HeLa细胞,用荧光显微镜观察荧光强弱及变化。结果经PCR、酶切、电泳、测序分析鉴定,Tre酶真核表达载体构建正确,转染HeLa细胞后,能特异性识别并剪切loxLTR序列。结论构建的Tre酶真核表达载体可在HeLa细胞中表达,并特异性识别loxLTR序列。
Tre酶、真核表达载体、人类免疫缺陷病毒-1、loxLTR序列、电穿孔
Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金31000084
2015-01-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
1254-1257