人端粒酶逆转录酶HLA-A* 0201限制性CTL表位的预测和鉴定

摘要：

目的 人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)在正常组织中不表达而在肿瘤组织中广泛表达,且与肿瘤生长密切相关,是肿瘤免疫治疗的理想靶位.HLA-A* 0201是中国人群中最为常见的HLA-I类分子的型别,阳性率达30％.筛选hTERT HLA-A* 0201限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)表位,对于有hTERT表达的人群的肿瘤免疫治疗有重要临床意义.文中采用生物信息学和免疫学方法,预测和鉴定hTERT的HLA-A* 0201限制性CTL表位. 方法 联合利用表位预测数据库SYFPEITHI、BIMAS和NetCTL和分子模拟技术对hTERT的HLA-A* 0201限制性CTL表位进行预测.用T2细胞株测定各肽与HLA-A *0201分子的亲和力和稳定性.酶联免疫吸附斑点法(enzyme linked immunospot assay,ELISPOT)检测HLA-A* 0201+健康人对肽的T淋巴细胞反应. 结果 预测得出hTERT抗原的6个CTL表位,即ILAKFLHWL(540 ～548)、LMSVYVVEL(548～556)、ILSTLLCSL(836 ～844)、CLKELVARV( 76～84)、LLGASVLGL (675～683)、FLDLQVNSL(923～931).分子模拟的计算结果提示ILAKFLHWL(540～548)和LLGASVLGL (675～683)肽与HLA-A*0201分子之间的结合较其他多肽稳固.亲和力实验结果表明上述2个肽与HLA-A* 0201的亲合力较强,荧光系数FI分别为3.20和2.98,肽-HLA-A* 0201复合物半数解离时间DC50均大于8h.ELISPOT显示ILLGASVLGL (675～683)与其他5个肽相比,可诱导较强的T淋巴细胞反应,T细胞频率为(534±57)个斑点形成细胞(spot-forming cell,SFC)/106个外周血单个核细胞( peripheral blood mononeuclear cell,PBMC). 结论 ILLGASVLGL( 675～683)有可能是人端粒酶逆转录酶HLA-A*0201的限制性CTL表位.

关键词：人端粒酶逆转录酶、T细胞表位、细胞毒性T淋巴细胞

所属期刊栏目：24

分类号：Q55(酶)

资助基金：国家自然科学基金项目30872979

在线出版日期：2011-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1013-1018