10.3969/j.issn.1008-8199.2008.05.009
应用噬菌体肽文库筛选肾综合征出血热病毒优势B细胞结合表位肽
目的:应用噬菌体展示肽文库筛选鉴定肾综合征出血热病毒优势B细胞结合表位肽. 方法:以Protein-A纯化的肾综合征出血热患者恢复期血清为筛选配基,对经正常人血清预吸附的噬菌体展示随机12肽文库(或次级肽文库)进行生物亲和淘选;夹心ELISA、竞争ELISA鉴定所获得克隆的结合特性,并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析. 结果:ELISA测定显示,通过5轮淘选得到的噬菌体克隆半数以上可与筛选血清发生特异性结合;对45个阳性克隆进行序列测定分析,根据其推导的氨基酸序列可大致分为8组,同源性分析显示,Ⅰ~Ⅶ组序列基序可能为LVXKR、LTXR、IXKP、LXPA、VGA、KXlR、EKXP,其中4组基序在病毒结构蛋白氨基酸序列中发现同源区. 结论:获得了一组肾综合征出血热病毒(HFRSV)优势B细胞表位肽,HFRSV核蛋白可能是诱导高水平抗体的主要免疫原,研究结果为基于表位的基因工程诊断试剂的研制和多肽疫苗的设计提供依据.
肾综合征出血热病毒、噬菌体展示肽文库、抗体、表位
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Q78(基因工程(遗传工程))
2008-07-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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