t-PAcDNA克隆、腺病毒载体构建及在小血管吻合口中的表达

摘要：

目的:探讨组织型纤溶酶原激活物(t-PA)基因疗法防治血管吻合口血栓栓塞的效果. 方法:①采用RT-PCR从Bowes黑色素瘤细胞中获得t-PA cDNA.②将含有t-PA基因的重组质粒pAdCMV t-PA与缺陷型腺病毒大框架pJM17共转染病毒包装细胞(293细胞),获得有感染能力但复制缺陷的重组腺病毒AdCMV t-PA.③实验动物随机分为对照组和治疗组,治疗组吻合口注射AdCMV t-PA溶液,对照组注射AdCMV(不含t-PA的空载体).提取吻合口组织的总RNA行RT-PCR,应用发色底物法检测吻合口组织的纤溶酶活力. 结果: ①成功地克隆了t-PA cDNA并构建腺病毒载体.②治疗组RT-PCR在2.0 kb前面约1.7 kb处有一条带,对照组则没有.治疗组术后第1、2、3、4、5、6、7、10和13天均可检测到纤溶酶活力,但第3天活力最高.对照组未检测到纤溶酶活力. 结论: 克隆入腺病毒载体的t-PA基因可在吻合口组织中表达出有生物学活性的t-PA,可有效地抑制吻合口血栓形成,提高吻合口通畅率.

关键词：组织型纤溶酶原激活物、腺病毒载体、基因治疗、血栓栓塞

所属期刊栏目：16

分类号：R735.1(肿瘤学)

在线出版日期：2003-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：743-745,748