10.3969/j.issn.1008-8199.2001.01.004
人穿孔素氨基端肽段的原核表达与纯化
目的:用基因工程方法表达人穿孔素(PFP)氨基端肽段,并加以纯化。 方法:构建表达人PFP蛋白N端118个氨基酸肽段(hPFP-N)的重组质粒,转化E. coli BL21菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。在十二烷基肌氨酸钠存在下以超声处理,使得到的融合蛋白包涵体溶解。通过谷胱甘肽琼脂糖柱亲和层析获得纯化的GST/hPFP-N融合蛋白,经凝血酶酶切去除GST部分。 结果与结论:pGEX-KG质粒能够高效表达GST/hPFP-N融合蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖亲和层析和凝血酶酶切后得到纯化的hPFP-N蛋白。
穿孔素、基因重组、表达、纯化
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R392.11
江苏省自然科学基金BK99157
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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