人穿孔素氨基端肽段的原核表达与纯化

摘要：

目的：用基因工程方法表达人穿孔素(PFP)氨基端肽段，并加以纯化。　方法：构建表达人PFP蛋白N端118个氨基酸肽段（hPFP-N）的重组质粒，转化E. coli BL21菌株，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。在十二烷基肌氨酸钠存在下以超声处理，使得到的融合蛋白包涵体溶解。通过谷胱甘肽琼脂糖柱亲和层析获得纯化的GST/hPFP-N融合蛋白，经凝血酶酶切去除GST部分。　结果与结论：pGEX-KG质粒能够高效表达GST/hPFP-N融合蛋白，经谷胱甘肽琼脂糖亲和层析和凝血酶酶切后得到纯化的hPFP-N蛋白。

关键词：穿孔素、基因重组、表达、纯化

所属期刊栏目：14

分类号：R392.11

资助基金：江苏省自然科学基金BK99157

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：9-11