PEX基因转染人脐带间充质干细胞的体外培养及鉴定

摘要：

目的 构建PEX基因真核表达载体并成功转染人脐带间充质干细胞(HuMSCs),探讨PEX基因修饰HuMSCs的可行性.方法 采用全贴壁细胞分离法培养HuMSCs,流式细胞技术鉴定其表面标记物;分子克隆技术构建PEX基因真核表达载体[PEX-pcDNA3.1(+)],重组质粒PEX-pcDNA3.1(+)转染HuMSCs,验证真核表达载体在HuMSCs中的表达.结果 ①P5代HuCMSCs表面分子标志物结果显示各代均表达间充质干细胞标志CD73、CD90和CD105,而不表达造血干细胞标志CD11b、CD19、CD34、CD45和组织相容抗原HLA-DR;②RT-PCR检测显示,目的基因PEX位于DNA Maker 500-750 bp的特异性条带;抽提质粒后双酶切鉴定显示,重组质粒PEX-pcDNA3.1(+)位于DNAMaker 5000 bp的特异性条带,且重组质粒PEX-pcDNA3.1(+)双酶切后位于DNA Maker 500～750 bp和5000 bp两条特异性条带;菌液测序结果证实,质粒载体PEX-pcDNA3.1(+)构建成功;重组质粒PEX-pcDNA3.1(+)在HuMSCs中高表达.结论 构建的PEX-pcDNA3.1(+)真核表达载体可用于转染HuMSCs,为进一步探讨其在胶质瘤治疗中的作用奠定了基础.

关键词：人脐带间充质干细胞、胶质瘤、PEX基因

所属期刊栏目：36

分类号：R739.41(肿瘤学)

在线出版日期：2023-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：88-92,97