10.3969/j.issn.1006-1959.2020.04.021
miR-449对骨髓间充质干细胞成骨分化调控的机制研究
目的 探究miR-449是否具有调控骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化的作用.方法 分离、培养骨髓MSCs,采用流式细胞仪检测CD44、CD29、CD34、CD45等表面相关标志抗原的表达鉴定骨髓MSCs;将MSCs分为对照组、miR-449a组、miR-449b组及anti-miR-449组,对照组用成骨诱导培养基培养,其余各组分别经miR-449a/b或inhibitors转染后在成骨诱导培养基培养,分别于培养第3、6、9、12天检测各组碱性磷酸酶活性,qRT-PCR检测miR-449a/b对成骨特异性基因Runx2、Osterix表达的影响.结果 ①第4代间充质干细胞CD44、CD29表达阳性,而CD34和CD45表达阴性,符合骨髓间充质干细胞的特征.②成骨诱导培养3、6、9、12 d后,MSCs细胞碱性磷酸酶活性较上一时间点升高,且呈时间依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);MSCs成骨诱导培养3、6、9、12 d后,Runx2、Osterix表达水平逐渐升高.③miR-449a组和miR-449b组AKP活性低于对照组,而anti-miR-449组AKP活性升高,差异有统计学意义(P<0.05);miR-449a组和miR-449b组Runx2、Osterix表达较对照组下调,差异有统计学意义(P<0.05).结论 本次实验成功分离、培养了骨髓MSCs,其具有体外成骨分化能力,而miR-449能抑制骨髓MSCs向成骨分化.
miR-449a/b、间充质干细胞、成骨分化
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R329(人体形态学)
广东省医学科学技术研究基金编号:A2017472
2020-04-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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