二苯乙烯苷对脂肪变性HEPG2细胞影响的实验研究

摘要：

目的建立油酸诱导脂肪肝离体细胞模型，考察二苯乙烯苷对其干预效果及相关机制。方法以离体人肝癌HepG2细胞为研究对象，以随机对照方式进行研究。实验一院用0.7mM、1.4mM、2.8mM三种不同浓度油酸和10%（V/V）胎牛血清的RPMI-1640完全培养基孵育HepG2细胞24h，制备肝细胞脂肪变性模型。油红O染色观察每组细胞形态和细胞内脂滴的形成情况，分别检测细胞内甘油三酯的含量，确定油酸造模的最佳作用浓度。实验二院实验分为6组院第1组为空白组，即正常肝细胞组；第2组为模型组，即脂变肝细胞组；第3组至第6组在脂变细胞中分别加入不等量二苯乙烯苷，使二苯乙烯苷终浓度分别为2uM、4uM、8uM和16uM。每组加药后继续孵育24h。油红O染色观察每组细胞形态和细胞内脂滴的形成情况，检测细胞内甘油三酯、总蛋白的含量，培养基中ALT、AST含量。实验三院实时定量RT-PCR法检测每组肝细胞乙酰CoA羧化酶mRNA水平的表达。实验数据以表示，用SPSS13.0统计软件对数据进行分析，P<0.05说明有统计学差异。结果①1.4mM油酸孵育人胚肝癌HepG2细胞24h后，油红O染色后倒置显微镜下可观察到HepG2细胞脂肪变性，胞浆内充满大量被油红O红染的脂滴，且细胞内甘油三酯含量明显增加（与空白组比较P<0.01），说明1.4mM油酸为制造脂肪变性HepG2细胞模型的最适浓度。②加入不同浓度的二苯乙烯苷（2uM、4uM、8uM、16uM）继续孵育24h后,油红O染色见细胞内脂滴较处理前减少,细胞脂化程度减轻，胞内甘油三酯随二苯乙烯苷浓度的增加而减少，与二苯乙烯苷呈剂量依赖性关系。模型组与正常组比较，AST有显著升高。加入不同浓度二苯乙烯苷后，上清内AST含量随药物浓度增加而逐步递减，呈剂量依赖性关系，其结果有统计学差异（<0.05）。各组间ALT无显著差异（>0.05）。③RT-PCR显示肝细胞脂肪变性后ACC mRNA表达增强，加入二苯乙烯苷处理后ACC mRNA表达明显减弱。结论①1.4mM油酸为制造脂肪变性HepG2细胞模型的最适浓度。②二苯乙烯苷能减少肝细胞内甘油三酯沉积，且与二苯乙烯苷浓度呈剂量依赖性关系。③二苯乙烯苷能改善肝脏病理形态，改善肝功能指标。榆二苯乙烯苷能抑制HepG2细胞中ACCmRNA的表达。

关键词：二苯乙烯苷、脂肪变性肝细胞、甘油三酯、ACCmRNA

分类号：R97;R5

在线出版日期：2015-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

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