免疫球蛋白降解酶IdeS在大肠杆菌中的表达、纯化及功能鉴定

摘要：

病原链球菌为逃避宿主的免疫反应,分泌一种可特异地裂解免疫球蛋白G的降解酶(immunoglobulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes,IdeS)oIdeS既可作为工具酶用于IgG的指纹分析,又可用于治疗与自身免疫反应相关的疾病.本研究基于质粒pCold构建了两种重组IdeS的表达载体,并在大肠杆菌Shuffle T7中进行异源表达,经亲和色谱纯化后检测其蛋白活性.结果表明N-端含有His6-标签的重组IdeS产量为4 mg·L-1,其与抗体IgG1以1∶200(m/m)在37℃反应30 min即可完全酶解.而N-端含有His6-标签且C-端含有硅胶亲和标签(SiBP)的重组IdeS产量为1.5 mg·L-1,其与抗体IgG1以1∶200(m/m)在37℃反应30 min才可反应完全.C-端融合肽对于IdeS产量与活性都有较大的影响,使其活性降低,不利于后续应用于药物研发.上述结果表明,本系统所表达的N-端含有His6-标签的IdeS重组蛋白具有较高的活性,完全能满足抗体类药物研发和作为工具酶用于IgG指纹分析的需求.

关键词：免疫球蛋白G降解酶、异源表达、IgG指纹分析、供体特异性抗体

所属期刊栏目：57

分类号：R931(生药学（天然药物学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目;北京协和医学院合成生物学学科建设专项

在线出版日期：2022-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2234-2239