白木香AsERF1基因的克隆、亚细胞定位与表达分析

摘要：

乙烯响应因子(ethylene-response factor, ERF)是AP2/ERF家族中的亚家族,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用.本研究以白木香(Aquilaria sinensis)为材料,设计特异性引物,克隆了白木香的AsERF1基因的cDNA序列,并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、组织特异性分析、非生物胁迫诱导表达分析研究.白木香AsERF1基因的开放阅读框(ORF)长691 bp,编码229个氨基酸,其蛋白分子质量为25.36kD.AsERF1蛋白含有1个保守的AP2区域,系统进化树分析表明AsERF1与毛果杨的ERF2蛋白亲缘性最高.利用本生烟瞬时表达系统研究表明AsERF1主要定位于植物细胞核中.构建原核表达载体pET28a-AsERF1,并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达AsERF1重组蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白.实时荧光定量PCR结果显示AsERF1在叶中的表达量最高,茎次之,根和茎尖最低.盐、干旱、低温和重金属胁迫能够诱导AsERF1的表达,其中干旱胁迫对AsERF1的表达水平影响最显著.本研究为揭示ERF基因在白木香防御反应和沉香形成过程中的作用机制奠定基础.

关键词：白木香、乙烯响应因子、原核表达、亚细胞定位、表达分析

所属期刊栏目：55

分类号：R931(生药学（天然药物学）)

资助基金：青年教师项目2019-JYB-JS-014

在线出版日期：2020-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1957-1964