中药黄芪蛋白抗肝癌细胞HepG2作用机制

摘要：

本文考察了黄芪蛋白对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用,结合转录组学探讨黄芪蛋白抗肿瘤作用机制.黄芪干燥根部经硫酸铵沉淀,得到分子质量大小不一的黄芪蛋白(Huang Qi protein,HQP).通过血球计数法检测黄芪蛋白对肿瘤细胞HepG2的影响及其毒性作用;结合流式细胞术和Hoechst/propidium iodide (PI)双染测定细胞死亡情况;Western blot测定坏死标志蛋白受体相互作用的丝氨酸/苏氨酸激酶l(RIPl);将对照组与加药组RNA进行转录组测序,对RNA测序(RNA-seq)结果进行差异表达基因分析;qRT-PCR验证候选基因mRNA相对表达量.结果 表明,随着HQP浓度增加,对肝癌细胞HepG2增殖抑制作用愈加明显,当HQP质量浓度为100 μtg·mL-1时,细胞坏死率增加到18.78％,同时在显微镜下观察到PI单染的红色坏死细胞增多,Western blot结果显示RIP1蛋白水平增加.RNA-seq结果分析得到2.6万个相关基因受HQP调控,其中979个基因受调控较明显.KEGG分析发现部分差异表达基因与p53信号通路相关,qRT-PCR验证测序结果可靠.黄芪蛋白使HepG2细胞发生程序性坏死可能与p53信号通路有关.

关键词：黄芪蛋白、程序性细胞死亡、RNA测序、p53、RIP1

所属期刊栏目：55

分类号：R285(中药学)

资助基金：国家国际科技合作专项基金;山西省黄芪资源产业化;产业国际化协同创新中心项目

在线出版日期：2020-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：241-246