康柏西普非还原SDS-PAGE纯度方法研究

摘要：

建立非还原SDS-PAGE纯度检测方法,以研究康柏西普降解物或片段的含量.本文针对凝胶的筛选、凝胶成像系统的比较、主带灰度值线性范围和脱色条件开展研究,确定了康柏西普非还原SDS-PAGE纯度测定方法的实验条件.结果显示:4％～15％梯度浓度胶分离效果好,带型清晰平整;高分辨率的凝胶成像系统能使主带、杂带响应峰基线分离;当上样量≤3 μg时,主带灰度值线性好,因此,以3 μg作为非还原SDS-PAGE纯度方法的上样量;脱色条件确定为60 min更换一次脱色液,每次100 mL,脱色时间不超过3h.所建立的非还原SDS-PAGE纯度测定方法能够更客观测定康柏西普的纯度,该方法经过验证后,以补充材料的形式提交美国FDA,为康柏西普在美国直接进入临床Ⅲ期研究奠定了质量基础.

关键词：非还原SDS-PAGE、线性、上样量

所属期刊栏目：53

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家药典委员会标准提高课题2018-23

在线出版日期：2019-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2099-2103