10.16438/j.0513-4870.2017-0715
细胞外基质仿生型基因活化支架的构建与表征
本文拟构建一种模拟细胞外基质结构与功能的基因活化支架(ECM-m-GAM),并对其结构、机械强度和释放性能进行表征.首先制备细胞穿膜肽TAT修饰的脂质体基因载体TAT-LPD,然后将TAT-LPD与RGD修饰的透明质酸混合,加入交联剂MMPs敏感肽(HS-MMP-SH),使透明质酸凝胶化,在凝胶化过程中实现对TAT-LPD的负载,从而将细胞黏附因子RGD、MMPs敏感底物和高效的基因转染载体TAT-LPD有机地整合到一个结构中,完成ECM-m-GAM的构建.利用PicoGreen试剂盒考察ECM-m-GAM在不同释放介质中DNA的释放行为.研究结果表明:TAT-LPD在透射电镜下呈球形,平均粒径为(263.0±4.30) nm,可被成功地包埋在ECM-m-GAM中;ECM-m-GAM具有典型的凝胶结构,机械强度随着透明质酸用量的增加而增强,透明质酸用量为4%时其弹性模量约为1 600 Pa,适合支架植入和组织修复;DNA从ECM-m-GAM中的释放呈现明显的MMPs敏感性,并且释放的DNA仍以纳米粒的形式存在,能够转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)并表达绿色荧光,为后续的细胞转染和组织修复研究奠定了基础.
凝胶、透明质酸、细胞外基质、基因转染、基质金属蛋白酶
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R943(药剂学)
国家自然科学基金;江苏省自然科学基金青年项目;中国博士后科学基金面上项目;江苏省博士后科研项目;江苏大学高级专业人才科研启动基金
2017-12-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
1748-1755