五味子甲素对NLRP3炎性小体活性的抑制作用及机制初步研究

摘要：

探讨五味子甲素(deoxyschizandrin,schisandrin A)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)中NLRP3 (NOD-like receptor family,pyrin domain containing 3)炎性小体活性的抑制作用及初步机制.CCK-8法检测细胞毒性,根据细胞存活率确定给药浓度.通过Western blot方法检测细胞培养上清中IL-1β和caspase-1的表达,分析不同浓度的五味子甲素(25、50、100和200 μmol·L-1)对尼日利亚菌素(nigericin,Nig)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导的NLRP3炎性小体活化的影响,检测细胞中pro-caspase-1、pro-IL-1β、ASC和NLRP3等蛋白的表达变化;免疫荧光技术分析NF-κB (p65)的入核情况.根据CCK-8法的结果,确定了五味子甲素的给药浓度范围为6.25～400 μmol·L-1.在25～200 μmol·L-1浓度内,五味子甲素能够抑制Nig和ATP引起的NLRP3炎症小体活化,进而抑制IL-1β的分泌.免疫荧光和Westem blot实验结果显示,五味子甲素对NLRP3炎症小体活性的抑制作用不依赖于NF-κB通路活性及其诱导的NLRP3、ASC和pro-IL-1β等炎性小体蛋白的表达.综上,本实验首次证实,五味子甲素在一定浓度范围内通过阻断caspase-1活化,抑制caspase-1对pro-IL-1β的剪切活化,进而抑制NLRP3炎性小体的活性,减轻免疫炎症反应.本研究为五味子甲素防治NLRP3炎性小体相关的疾病提供了参考依据.

关键词：五味子甲素、NLRP3炎性小体、炎症反应、caspase-1

所属期刊栏目：52

分类号：R963(药理学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2017-02-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：80-85