稳定表达人OCTN1/OCTN2的细胞模型构建及应用

摘要：

人肉碱/有机阳离子转运体1和2 (human camitine/organic cation transporters,hOCTN1/hOCTN2)参与多种内、外源物质转运.本研究拟构建稳定表达hOCTN1/2的细胞模型,用于药物与转运体相互作用的研究.将重组质粒pcDNA3.1 (+)-hOCTN1/2转染MDCK细胞,经G418抗性筛选挑取单克隆细胞株,以麦角硫因(OCTN1经典底物)或米屈肼(OCTN2经典底物)进行细胞积聚研究,挑选功能最优的MDCK-hOCTN1/2细胞株为模型细胞.进一步考察经典底物的积聚动力学,并探究内源物、生物碱、黄酮及普利类药物对hOCTN1/2的抑制作用.结果显示,麦角硫因在MDCK-hOCTN1细胞上的积聚量为mock细胞的122倍,Km和Vmax为8.19±0.61 μmol·L-1和1 427±49 pmol·mg-1(protein)·min-1;米屈肼在MDCK-hOCTN2细胞上的积聚量为阴性对照(mock细胞)的108倍,Km和Vmax为52.3±4.3 μmol·L-1和2454±64 pmol·mg 1(protein)·min-1.多巴胺、谷氨酰胺、胡椒碱、黄连素、荷叶碱、赖诺普利和福辛普利对hOCTN1/2有显著的抑制作用.因此,本研究构建的MDCK-hOCTN1/2细胞模型可应用于药物与hOCTN1/hOCTN2相互作用研究.

关键词：人肉碱/有机阳离子转运体1和2、麦角硫因、米屈肼、抑制作用、犬肾上皮细胞

所属期刊栏目：51

分类号：R943(药剂学)

资助基金：国家自然科学基金;浙江省科技厅项目

在线出版日期：2016-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：931-937