铁皮石斛促分裂原活化蛋白激酶基因DoMPK4的分离和差异表达分析
促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是所有真核生物中普遍存在的一种重要的信号转导组分,在植物生理代谢、生长发育和激素反应等多项途径中起重要调控作用.本研究利用RT-PCR、RACE方法,从珍稀濒危兰科药用铁皮石斛中分离到一个新的促分裂原活化蛋白激酶基因,命名为DoMPK4 (GenBank注册号JX297597).DoMPK4基因cDNA全长1518 bp,编码一条由369个氨基酸组成的肽链,相对分子质量42.42 kD,等电点为5.55.推定的DoMPK4蛋白不含信号肽,具有一个跨膜域(214~232),包含MAPK蛋白家族保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性位点(158~170)和MAP激酶的保守位点(71~174).多序列比对表明,DoMPK4与多种植物MAPKs蛋白一致性较高(74.9%~80.6%).进化树结果显示,DoMPK4隶属于植物MAPKs蛋白的GroupA分支,与单子叶植物亲缘关系较近.实时定量PCR分析表明,DoMPK4在石斛根、茎、叶、种子和原球茎等5种器官中的相对表达量有显著差异.DoMPK4转录本在原球茎中的表达量为叶中的17.65倍,种子、根和茎等次之,分别为5.84、2.28和1.64倍.DoMPK4在原球茎较萌发种子中的高表达量特征,提示该基因在原球茎发育过程中起一定作用.
铁皮石斛、激酶、原球茎、实时定量PCR
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R931(生药学(天然药物学))
2014-08-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1076-1083