酶切-熔解曲线分析:一种新的SNP分型方法及其在中药材鉴定中的应用
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酶切-熔解曲线分析:一种新的SNP分型方法及其在中药材鉴定中的应用

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单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)是一种重要的DNA分子标记,在中药真伪鉴定中有广泛应用.为寻找一种简单快速、稳定性好的SNP分型方法,本研究将限制性内切酶引入熔解曲线分析中,建立了一种新的SNP分型方法,并分别以金银花/山银花、白术/苍术叶绿体序列SNP位点为例,检测了位于或不位于内切酶识别序列区的SNP位点分型能力,结果表明在引物5’端加上长链GC夹子(cggcgggagggcgg)进行扩增,然后选择合适的限制性内切酶酶切,金银花或白术正品酶切产物熔解曲线均为双峰,而混淆品山银花或苍术均为单峰,可实现准确分型,且该方法简单快速、稳定性好,被命名为酶切-熔解曲线分析法(restriction endonuclease digest-melting curve analysis).

SNP分型、酶切-熔解曲线分析、中药材鉴定

49

R931(生药学(天然药物学))

国家自然科学基金资助项目81373959;中医药行业科研专项201407003

2014-04-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共8页

558-565

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药学学报

0513-4870

11-2163/R

49

2014,49(4)

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