转化次丹参酮二烯酿酒酵母全细胞催化体系的构建
丹参酮是中药丹参的重要活性成分之一,其代谢途径尚未明确.快速筛选和鉴定丹参酮生物合成途径相关基因具有重要意义.铁锈醇作为丹参酮代谢途径中间产物,其产量相对较低,为得到大量铁锈醇用来作为下游P450功能鉴定的底物进行下游途径解析,迫切需要建立高效转化次丹参酮二烯至铁锈醇的体系.本文以酿酒酵母为宿主,构建了含有催化次丹参酮二烯生成铁锈醇的CYP76AH1及P450还原酶SmCPR1全细胞催化体系,并在DNA及mRNA水平对其进行了表征.通过透性剂处理,实现了一步生物转化合成铁锈醇,转化效率达到了69.9%.该研究证实含有CYP76AHl及来源于丹参的细胞色素还原酶SmCPR1的酿酒酵母能够将次丹参酮二烯转化为铁锈醇,研究结果不仅为生物转化生产铁锈醇提供了一个有效平台,还可以用于鉴定丹参酮下游合成的其他CYP450的功能.
丹参、CYP76AH1、酿酒酵母、全细胞催化
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R931(生药学(天然药物学))
国家自然科学基金资助项目81202871,81072990;北京市教育委员会科学研究与研究生培养共建项目
2013-11-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1618-1623