罂粟COR和BBE基因RNAi载体构建及烟草转化
本研究通过RNAi技术,使用发卡RNA结构沉默罂粟可待因酮还原酶(COR)与小檗碱桥酶(BBE)基因的表达.采用RT-PCR技术克隆得到COR和BBE基因全序列,同源性比较结果显示,它们与GenBank中已报道的COR和BBE基因高度同源;按照RNAi设计原则,筛选出了COR和BBE基因靶标序列,并采用重叠PCR法将其拼接成643 bp的融合基因,以中间载体pHANNIBAL和植物表达载体pCEPSPS为基础,构建ihpRNA植物表达载体,用农杆菌介导法将目的基因转入烟草中,共获得转基因植株78株,通过PCR检测从中筛选出了17株阳性植株,可初步确定目的基因已经整合到烟草基因组中.
罂粟、COR和BBE基因、RNAi、转化
48
S336(作物遗传育种与良种繁育)
国家自然科学基金资助项目31160303;教育部博士学科点研究基金项目2007733008;甘肃省卫生厅重点中医药科技项目2008HDTC02
2013-10-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共9页
1169-1177