Cε3-Cε4蛋白核酸适配子筛选与鉴定

摘要：

设计并合成随机ssDNA文库,以硝酸纤维素膜为筛选介质,利用SELEX技术筛选人Cε3 -Cε4蛋白特异性高亲和力核酸适配子,通过对退火温度、循环次数及靶蛋白与ssDNA摩尔比等关键参数进行优化,建立了适合的筛选体系.ELISA测定各适配子亲和力,获得了人Cε3 -Cε4蛋白高亲和力、高特异性适配子,并分析了其一级结构和二级结构.以所获高亲和力适配子分别作为捕获适配子和检测适配子,建立了酶联适配子吸附试验(enzyme-linked aptamers sorption assay,ELASA)方法,灵敏度达到120 ng.mL-l,可用于人IgE的定量检测.

关键词：配体指数级富集系统进化、免疫球蛋白E、适配子、酶联适配子吸附试验

所属期刊栏目：47

分类号：R963(药理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81202338;河北省自然科学基金资助项目C2010000248;河北大学博士后经费资助114184

在线出版日期：2013-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1605-1611