单链聚乙二醇化重组人干扰素ω的制备及其性质
采用直链PEG-琥珀酰亚胺琥珀酸酯(mPEG-SS)选择性修饰重组人干扰素ω(rhIFNω),离子交换色谱和凝胶过滤色谱组合分离纯化单链PEG修饰产物(PEG-rhIFNω),基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)测定单链PEG-rhIFNω的相对分子量,并利用RP-HPLC和SDS-PAGE对修饰产物进行分析.在优化的工艺条件下,分离纯化收集液的单链PEG-rhIFNω,平均含量达182 μg.mL-1,分离纯化收率超过22%,纯度大于98%,SDS-PAGE法测得表观分子质量为60 810,MALDI-TOF MS法测得相对分子质量为43 790;单链PEG-rhIFNω具有典型PEG修饰蛋白的特性,抗病毒活性保留率为15.0%,抗原性降低了64倍,酸稳定性、抗胰酶水解能力、血清稳定性和热稳定性均显著提高.单链PEG-rhIFNω的药学性质获得显著改善,有望开发为安全、长效的新型干扰素.
重组人干扰素ω、聚乙二醇化、纯化、稳定性、抗原性
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TQ464.7;Q816
国家科技重大专项;博士基金
2012-05-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
393-398