建泽泻法呢基焦磷酸合酶分子克隆、分布表达及生物信息学研究

摘要：

三萜类化合物是道地药材建泽泻中的主要药效成分,在癌症治疗方面有很大的应用潜力.法呢基焦磷酸合酶(FPPS)为三萜类化合物合成途径中的重要限速酶之一,本文运用同源克隆和快速cDNA末端扩增(PACE)技术相结合的方法,克隆了建泽泻FPPS基因的全长cDNA(accessionn no.HQ724508),FPPS cDNA全长为1 531 bp,含有1个1 032 bp的开放阅读框,编码343个氨基酸的蛋白,包含5个保守的功能域,其中两个富含天冬氨酸(DDXXD).实时荧光定量PCR(QRT-PCR)结果显示建泽泻FPPS基因在各器官中均有表达,10月至12月上旬相对表达量呈上升趋势,后下降,其中叶片表达量较高,块茎、根、叶柄表达量相对较低.高效液相(HPLC)分析结果表明不同生长期建泽泻主要药效成分23-乙酰泽泻醇B变化趋势与FPPS基因表达量变化一致,初步证明FPPS是泽泻醇类化合物合成途径中的重要调控位点.本研究为利用植物基因工程改善中药材品质提供科学依据.

关键词：建泽泻、法呢基焦磷酸合酶、分子克隆、实时荧光定量PCR、23-乙酰泽泻醇B

所属期刊栏目：46

分类号：R931(生药学（天然药物学）)

资助基金：国家科技支撑计划;江苏省教育厅项目;江苏省"青蓝工程"项目

在线出版日期：2011-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：605-612