重组腺病毒人白细胞介素2的质量分析

摘要：

目的通过对重组腺病毒人白细胞介素2(Adv-IL2)的质量研究和实验方法参数的选择,建立Adv-IL2的质量控制标准.方法选用CPE法测定病毒滴度;将病毒转染Hela细胞,表达出IL-2,分别用MTT法和ELISA法测定IL-2的活性和表达量.建立了UV和IE-HPLC系统分析纯度;琼脂糖凝胶电泳检查基因组分子量和基因组酶切图谱;PCR法鉴定病毒特征基因E2B区、IL-2表达基因盒和外源因子(复制型病毒RCV,HIV,HBV和HCV);按照<中国生物制品规程>的有关规定进行了其他项目检查.结果测定的重组腺病毒人白细胞介素2原液滴度达3×1010 pfu*mL-1.IL-2表达活性达700 U*mL-1,表达量约25 ng*mL-1.制品的A260 nm/A280 nm为1.23;IE-HPLC纯度检查大于98%.基因组分子量和基因组酶切图谱以及病毒特征基因E2B区和IL-2表达基因检查结果均在理论值范围;复制型病毒RCV,HIV,HBV和HCV检测均呈阴性;其他项目均符合规定.结论建立了重组腺病毒人白细胞介素2的质量标准,并可有效地控制制品的质量.

关键词：腺病毒载体、IL-2、质量标准、基因治疗

所属期刊栏目：37

分类号：R912.2;R917(药物基础科学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：639-643