两种新型无血清培养基器官培养保存兔角膜内皮细胞活性的实验研究

摘要：

目的 研究两种新型培养基-内皮细胞培养基(ECM)和无动物成分培养基(ACF)在无血清器官培养法保存角膜内皮细胞活性方面的效果。方法 将64枚兔角膜平均分为4份,分别密闭保存于ECM+ 2％胎牛血清(FBS)、ECM和ACF等4种不同的培养基中4周,再以葡聚糖T500脱水2d。伊格尔最低基础培养基(MEM)作对照组。检测保存前后角膜内皮细胞密度、角膜厚度、内皮层中肌动蛋白微丝(F-actin)的表达和透射电镜下内皮细胞超微结构的变化。结果 保存结束后,ECM+ 2％ FBS组的兔角膜内皮细胞密度最高(2123±240)个/mm2,ECM和ACF组结果与其接近,内皮细胞死亡率也较低,对照组内皮细胞密度最低( 1732±144)个/mm2,3个实验组与对照组间差异有统计学意义(F=23.180,P=0.000)。免疫组织化学染色显示F-actin在兔角膜内皮层成功表达。WB半定量检测表明F-actin蛋白在各组角膜内皮层的表达趋势与内皮细胞密度计数结果一致,3个实验组与对照组间差异有统计学意义(F= 159.876,P=0.000)。3个实验组内皮细胞的超微结构与正常角膜区别较小。结论 在器官培养法保存过程中,无血清的ECM和ACF培养基可以较传统MEM培养基更好地保持角膜内皮细胞的活性和屏障功能,在无血清器官培养保存角膜方面具有应用前景。

关键词：兔、角膜内皮细胞、器官培养法、无血清培养

所属期刊栏目：33

分类号：R776.1(眼科学)

在线出版日期：2011-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：561-565