斜率比法测定水蛭抗凝血活性的方法学验证研究

摘要：

目的:进行斜率比法测定水蛭抗凝血活性的实验室内方法学验证研究.考察斜率比法测定水蛭抗凝血活性作为质量控制方法的可行性.方法:选用7批蚂蝗和日本医蛭饮片,分别用蚂蝗对照药材和菲牛蛭对照药材,平行制备不同浓度浸提液,测定活化的部分凝血活酶时间(APTT)后用斜率比法测定抗凝血活性.在实验室内进行专属性、线性与范围、精密度、准确度、耐用性等多个方面的系统考察.结果:使用斜率比法测定水蛭抗凝血活性,专属性考察:该条件下土鳖虫不显示其抗凝血活性,水蛭浸提液100℃加热后活性降低,添加低分子肝素后试验不成立,用蚂蝗对照药材做对照测定日本医蛭抗凝血活性则试验不成立,说明本法的专属性和选择性较好.准确度考察:采用蚂蝗对照药材和菲牛蛭对照药材,64％、80％、100％、125％和156％的5个相对水平值测定值的相对偏差均＜±20％,效价理论值对数(横坐标)和对应的效价测定值对数(纵坐标)呈现明显的直线关系,相关系数＞0.95,斜率在0.95～1.05,说明方法的准确度较好.精密度考察:各相对效价水平的几何变异系数(GCV,％)均＜20％;采用多批次的饮片测定RSD均＜20％,说明本法的精密度较好.线性与范围考察:本法在相对于对照药材的在64％～156％,都能够进行准确测定,线性范围符合要求.耐用性考察:水蛭浸提液可放置24 h、37℃加热1 h后活性均未见改变,说明本法耐用性较好.结论:斜率比法测定水蛭抗凝血活性具有较好的精密度、准确度和重现性,量化测定水蛭抗凝血活性的生物检定方法,适用于水蛭的质量控制.

关键词：水蛭、斜率比法、活化的部分凝血活酶时间、抗凝血活性、方法学验证、专属性、准确性、精密度、量化测定、质量控制

所属期刊栏目：43

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家药典委员会药品标准提高研究2016453

在线出版日期：2023-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：405-413