3种mRNA疫苗dsRNA残留量检测方法的比较

摘要：

目的:对mRNA疫苗dsRNA残留量的常用检测方法均相时间分辨荧光法(homogeneous time resolved fluorescence,HTRF 法)、酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA 法)和斑点杂交法(Dot Blot法)进行比较研究,为mRNA疫苗质量控制提供技术支撑.方法:分别根据HTRF法、ELISA法和Dot Blot法特点,配制相应浓度标准品,通过建立标准曲线,计算样品dsRNA浓度,考察3种方法的适用性、准确度、精密度、定量限和曲线拟合关系.结果:HTRF法检测dsRNA残留量的回收率为110.7％,重复性的RSD为5.6％,中间精密度的RSD≤19.0％,在 1.56～100.00 ng·mL-1的质量浓度范围内,拟合关系良好(r =0.999 3);ELISA法检测dsRNA残留量的回收率为103.2％,重复性的RSD为19.5％,中间精密度的RSD≤11.7％,在7.81～500.00 ng·mL-1的质量浓度范围内,拟合关系良好(r =0.999 8);Dot Blot法检测dsRNA残留量的回收率为101.5％,重复性的RSD为18.5％,中间精密度的RSD≤42.2％,在800.00～80 000.00 ng·mL-1的质量浓度范围内,拟合关系良好(r =0.999 2).HTRF法和ELISA法的准确度和精密度良好,HTRF法可检测较低浓度的dsRNA残留量.结论:3种方法均可有效检测mRNA疫苗中的dsRNA残留量.

关键词：mRNA疫苗、dsRNA残留量检测、均相时间分辨荧光法、酶联免疫法、斑点杂交法

所属期刊栏目：42

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家重点研发计划2020YFC0860500

在线出版日期：2023-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1941-1946