基于Cocktail探针药物法研究木犀草素在大鼠体内对CYP450酶活性影响

摘要：

目的:应用Cocktail探针药物法评价木犀草素对大鼠体内CYP450酶亚型活性的影响.方法:首先将大鼠随机分为空白组和木犀草素组,2组分别灌胃羧甲基纤维素钠(2.0 mL·kg-1)和木犀草素(30.0 mg·kg-1)1 d,并于第7 d腹腔注射混合探针药物溶液(含10.0 mg·kg-1的非那西汀和睾酮,2.5 mg·kg-1的甲苯磺丁脲).之后在不同时间点对大鼠进行眼眶取血,血浆样本经异丙醇沉淀后进入液质测定.UHPLC-MS/MS色谱部分采用ZORBAX SB-C18(2.1 mm×30 mm,3.5 μm)色谱柱进行分离,以乙腈-0.1％甲酸水为流动相,梯度洗脱;质谱部分使用电喷雾离子源(ESI),分别在正、负离子条件下采用MRM模式下进行监测,将所采集数据输入DAS软件计算药动学参数.另外,采用Western blot法观察木犀草素对CYP450蛋白表达的影响,对体内结果做进一步验证.结果:非那西汀、睾酮、甲苯磺丁脲分别在2.0～2 000.0、0.3～300.0及1.7～1 700.0 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,定量限分别为2.0、0.3、1.7 ng·mL-1.所建立UHPLC-MS/MS法专属性良好,各待测药物准确度在96.9％～108.0％范围内,日间和日内精密度RSD均小于8.9％,提取回收率、基质效应以及稳定性考察项目均符合测定要求.药动学结果显示,与空白组相比,木犀草素组非那西汀AUC值明显降低,甲苯磺丁脲和睾酮AUC值均呈现升高趋势,但睾酮变化非常轻微.Western blot结果表明,木犀草素组大鼠CYP1A2蛋白表达增加,而CYP2C9和CYP3A4蛋白表达减少.结论:根据FDA CYP450酶诱导剂和抑制剂标准,木犀草素可作为CYP1A2的中度诱导剂,CYP2C9的弱抑制剂,但对CYP3A4无显著影响.

关键词：木犀草素、液质联用法、药代动力学、探针药物、CYP450酶、免疫印迹法

所属期刊栏目：42

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金81970055

在线出版日期：2022-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：279-286