10.16155/j.0254-1793.2022.01.02
人胰岛素及其类似物UPLC-MS/MS全序列分析研究
目的:建立采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定人胰岛素及其类似物全序列的方法.方法:该方法以人胰岛素为主要研究对象,首先对其进行还原烷基化前处理,后进行UPLC-MS/MS分析.采用 ACQUITY UPLC peptide BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm,300?)色谱柱,流动相 A 为0.1%甲酸/水溶液,流动相B为0.1%甲酸/乙腈溶液,梯度洗脱(0~10 min,3%B→60%B;10~10.5 min,60%B→95%B;10.5~14 min,95%B;14~14.5 min,95%B→3%B;14.5~20 min,3%B),流速0.3 mL·min-1,柱温50℃;采用电喷雾离子源正离子(ESI+)扫描,通过优化质谱参数,对人胰岛素及其类似物进行"top-town"全序列的测定分析,并对人胰岛素的序列测定方法进行了深入的研究,同时考察该方法对门冬胰岛素和赖脯胰岛素的适用性.结果:该方法能够较好地覆盖人胰岛素A和B链的全序列,通过b/y离子分析,5个高强度b/y离子的离子强度RSD在20%之内,A链与B链一级质量数准确,其精密度、准确度良好;该方法可区分与其他胰岛素类似物的序列的不同,专属性良好,且对门冬胰岛素和赖脯胰岛素具有良好的适用性.结论:该方法操作简便,准确性好,专属性强,为胰岛素及其类似物的全序列测定提供了数据支持.
糖尿病、人胰岛素及其类似物、超高效液相色谱-串联质谱、全序列测定、N端序列测定
42
R917(药物基础科学)
国家科技重大专项2018ZX09101001-003
2022-04-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共10页
13-22