白头翁皂苷B4对小鼠肝药酶CYP1A2表达及酶活性的影响

摘要：

目的:观察白头翁皂苷B4体内、体外对小鼠肝药酶CYP1A2酶活性及表达的影响,为白头翁B4的药物相互作用提供实验依据.方法:采用UHPLC XB-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8 μm)分离样品,以0.1％甲酸水和乙腈为流动相,流速0.3 mL·min-1,采用电喷雾离子源(ESI)正离子模式,多反应离子(MRM)扫描方式,定量离子对为m/z 180.1～109.9,建立检测非那西丁的UPLC-MS/MS检测方法.制备正常小鼠肝粗酶液并建立体外酶孵育体系,将粗酶液与探针非那西丁(4 μg·mL-1)、B4溶液(50μg·mL-1)进行孵育,UPLC-MS/MS检测孵育5、15、30、60、120 min体系中非那西丁含量,绘制时间与含量的线性方程,对方程中a值进行统计分析以反映非那西丁的代谢速率.小鼠静脉注射给药3 d后腹腔注射探针非那西丁(2 mg·kg-1),UPLC-MS/MS测定注射后5、15、30、60 min小鼠血浆中非那西丁含量,qPCR和WB分别检测肝脏中mRNA、蛋白表达.结果:非那西丁浓度在4～2 000 ng·mL-1范围内与峰面积线性关系良好(r2=0.993 6),检测下限为0.1 ng·mL-1(S/N≥3),定量下限为0.2 ng·mL-1(S/N≥10),日内精密度RSD小于5％,日间精密度RSD小于10％,回收率为88.5％～92.9％.B4体外对非那西丁的代谢速率无明显影响(P＞0.05);B4可明显加快小鼠血浆中非那西丁的代谢速率(P＜0.01),且一定程度上调小鼠肝组织中CYP1A2 mRNA和蛋白表达.结论:白头翁皂苷B4体外对CYP1A2酶活性无明显影响,体内对该酶活性有缓和的促进作用,其促进作用与上调该酶的基因转录和蛋白表达有关.

关键词：白头翁皂苷B4、UPLC-MS/MS、小鼠、非那西丁、CYP1A2、探针、体内、体外

所属期刊栏目：41

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：江西省中药学一流学科专项基金项目;国家重点研发计划资助

在线出版日期：2021-08-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：970-978