聚乙二醇化重组人促红素不同位点修饰率的测定

摘要：

目的:测定聚乙二醇化重组人促红素(PEG-EPO)中不同修饰位点的修饰率.方法:将重组促红素(EPO)及PEG-EPO样品分别用Lys-C蛋白酶进行酶切,在含0.1％三氟乙酸的流动相体系下液质联用测定液质肽图;通过质谱鉴定各肽段,在215 nm波长采集的肽图中积分计算各肽段的峰面积百分比;根据EPO及PEG-EPO肽图中对应肽段峰面积百分比的变化,利用软件计算各位点的修饰率.结果:所建立的方法成功计算出PEG-EPO中9个位点的修饰率.该方法还用于3家企业的产品比较,结果显示:3家企业的产品在PEG修饰方面的总体趋势一致,但在个别位点存在修饰率的差异,比如N-末端和Lys45.结论:该方法可用于PEG-EPO制品的常规质量控制,以及不同企业产品的比对研究.

关键词：聚乙二醇、重组人促红素、修饰率、液质肽图、Lys-C蛋白酶、质量控制、液质联用、比对研究

所属期刊栏目：40

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家药典委员会药品标准制修订研究课题2019S04

在线出版日期：2020-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1697-1701