基于mt DNA cyt b基因兔睾丸鉴定方法的建立及检测试剂盒的研制

摘要：

目的:建立兔睾丸DNA指纹鉴定方法,研发出兔睾丸DNA检测试剂盒.方法:以穴兔线粒体DNA(mt DNA)细胞色素b(cyt b)基因作为靶基因,设计兔睾丸特异性引物,利用现代DNA指纹技术,研制兔睾丸DNA提取及检测试剂,并对试剂的特异性、重复性及稳定性进行考察;应用分子克隆及测序技术,克隆兔睾丸DNA检测的标准品;进而建立兔睾丸DNA指纹鉴定方法,制定质量标准,开发出兔睾丸DNA检测试剂盒.结果:自主研发的试剂提取的兔睾丸DNA结构完整性较好,DNA浓度与纯度均较高;59℃时引物的特异性最强;兔睾丸正品均在326 bp处出现1条特异性扩增条带,而阴性及空白对照均未出现扩增条带;克隆测序后的兔睾丸DNA序列与穴兔mt DNA特异指纹区段同源性100％.结论:本研究建立的兔睾丸DNA指纹鉴定方法特异、准确、可靠,研发的DNA检测试剂盒操作简便,结果稳定,适于普及推广使用.

关键词：兔睾丸、线粒体DNA细胞色素b基因、DNA指纹技术、PCR技术、分子克隆、基因测序、DNA检测试剂盒

所属期刊栏目：40

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：吉林省科技发展计划;吉林省科技发展计划;吉林省科技发展计划;吉林省科技发展计划;吉林省科技发展计划;吉林省发改委项目;吉林省科技创新中心建设项目

在线出版日期：2020-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1376-1383