分子体积排阻高效液相色谱法测定低浓度重组人源化抗BCMA/CD3双特异性抗体药物的浓度

摘要：

目的:建立定量测定溶剂中低浓度重组人源化抗BCMA/CD3双特异性抗体药物浓度的分子体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC法).方法:采用TSKgel G3000SWxl(7.8 mm×300 mm,5μm)体积排阻色谱柱,高效液相紫外检测器在214 nm处测定抗体药物吸收度.对SEC-HPLC法进行专属性、系统残留、线性、精密度、稳定性方法学验证,并使用该方法和紫外-可见分光光度法测定样品浓度,进行准确度分析.结果:SEC-HPLC法对抗体药物浓度的测定无干扰;在0.01～0.32 mg·mL-1浓度范围内,SEC-HPLC法线性良好(相关系数R2=1.000);不同实验者不同时间使用该方法可准确测定抗体药物浓度,RSD均≤2.0％,回收率均处于90.0％～110.0％之间;-80℃反复冻融和2～8 ℃存放24 h后,SEC-HPLC法仍能准确测定抗体药物浓度,稳定性良好(RSD≤2.0％).SEC-HPLC法能准确测定样品浓度,RSD≤2.0％,回收率均处于90.0％～110.0％之间,而紫外-可见分光光度法不能准确测定低浓度(0.01 mg·mL-1)样品的浓度,RSD为5.7％,回收率为131.6％.结论:SEC-HPLC测定浓度法准确性和精密度良好,能准确测定溶媒剂中0.01～0.32 mg· mL-1范围内抗体药物浓度,能避免紫外-可见分光光度法测定0.01 mg·mL-1样品不准确的局限性,可作为测定低浓度重组人源化抗BCMA/CD3双特异性抗体药物浓度的有效方法之一.

关键词：分子体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC)、紫外-可见分光光度法、抗体药物、方法验证、浓度

所属期刊栏目：40

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2020-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1365-1370